Бульон Фрейзера (М1327)

Этот бульон рекомендуется комитетом ISO для первичного и вторичного обогащения, выделения и подсчета Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных. 

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 54,92 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (1210C) 15 минут. Остудить до 45-50°С и асептически добавить: для получения 1000 мл среды первичного обогащения ― растворенное содержимое 1 флакончика с селективной добавкой Фрейзера (FD125I) и 2 флакончиков с добавкой Фрейзера (FD141); для получения 500 мл среды вторичного обогащения ― по одному флакончику каждой добавки. Тщательно перемешать и разлить в стерильную посуду.

Примечание: Хлорид лития ядовит. Избегать контакта и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно обильно промыть ее водой.

Принцип и оценка результата:

Данная среда готовится по прописи Fraser и Sperber (1) с небольшой модификацией. Она рекомендована международным комитетом (ISO) для первичного и вторичного обогащения, выделения и подсчета Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных. Различия состоят лишь в используемых добавках. Пептон, гидролизат казеина, мясной и дрожжевой экстракты используются в качестве источника углерода, азота, витаминов и минеральных веществ, хлорид лития подавляет рост энтерококков. Налидиксовая кислота акрифлавин повышают селективность среды, подавляя рост грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов. Листерии гидролизуют эскулин до глюкозы и эскулетина, который, реагируя с цитратом аммонийного железа, образует комплексное соединение, окрашивающее среду в темно-коричневый или черный цвет.

Пробы засевают в среду первичного обогащения (с содержимым 1 флакончика добавки FD125I и 2 флакончиков добавки FD141 на 1000 мл среды) и инкубируют 24 ч при 30°C. Затем 0,1 мл культуральной жидкости переносят в среду вторичного обогащения (с содержимым 1 флакончика добавки FD125I и 1 флакончика добавки FD141 на 500 мл среды) и инкубируют 48 ч при 35-37°C. После обогащения культуры высевают на оксфордский агар и/или среду PALCAM для выделения и подсчета листерий.

Контроль качества:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна. После внесения добавок раствор дает флюоресценцию и может содержать легкий преципитат.

При 25°С водный раствор (5,49% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С .

Примечание: * почернение среды