Среда цистин-селенитовая(М025)

Эти среды используют в качестве сред обогащения для выделения сальмонелл из фекалий, мочи и другого патологического материала.

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 23,0 г порошка М025А или 17,0 г порошка М025I в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить в стерильные пробирки. Стерилизовать в кипящей водяной бане или в струе пара в течение 10 мин. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Перегревание ухудшает свойства среды. Если большое количество селенита восстановилось (что видно по количеству красного преципитата на дне пробирки или флакона), среда не подлежит использованию.

Предупреждение: Селенит натрия очень токсичен, обладает коррозивной активностью и тератогенным действием, поэтому с ним надо обращаться очень осторожно. При попадании на кожу этот участок надо обильно промыть водой.

Принцип и оценка результата:

Впервые избирательный подавляющий эффект селенита показал Klett (1). Guth (2) использовал его для выделения возбудителя брюшного тифа. Изучая селенит, Лейфсон составил питательную среду (3), которая затем была дополнена цистином (4). Приведенная пропись соответствует рекомендациям АОАС (5) для определения сальмонелл в пищевых продуктах, особенно яичных. Ее рекомендуют также для выделения сальмонелл другие официальные документы (6, 7, 8, 9). Этот бульон полезен для обнаружения небольших концентраций сальмонелл в материале, например, от микробоносителей, реконвалесцентов, при эпидемиологических исследованиях (10).

Гидролизат казеина является источником азотистых питательных веществ. Лактоза поддерживает рН среды, так как бактерии восстанавливают селенит, защелачивая ее. Повышение значений рН ослабляет токсическое действие селенита на сопутствующую флору, которая может размножаться и затруднять выделение сальмонелл. Разложение лактозы ферментирующими ее микроорганизмами снижает рН до нейтральных значений. Фосфат поддерживает рН на заданном уровне и также способствует сохранению токсического действия селенита на сопутствующую микрофлору. L-цистин также способствует выделению сальмонелл. После обогащения в бульоне материал высевают на плотную среду. Бульон не рекомендуют инкубировать более 24 ч, т.к. после 6-12 ч подавляющий эффект селенита ослабевает (11).

Контроль качества:

Гомогенный сыпучий порошок кремового цвета.

Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует.

При 25°С водные растворы М025А (2,3% вес/об) или М025I (1,7% вес/об) имеют рН 7,0 ± 0,2.

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С с последующим субкультивированием на агаре МакКонки (М081).