Агар Цитратний, Симмонса М099

Эти среды используют для дифференциации энтеробактерий.

Состав**:

Ингредиенты	М411 грамм/литр	М099 грамм/литр
Магния сульфат	0,20	0,20
Аммония дигидрофосфат	0,20	1,00
Натрия аммонийного фосфат	0,80	–
Калия гидрофосфат	–	1,00
Натрия цитрат	–	2,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Бромтимоловый синий	0,08	0,08
Агар-агар	15,00	15,00
Конечное значение рН (при 25°С)	7,0 ± 0,2	6,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 21,3 г порошка М411 в 900 мл дистиллированной воды или 24,28 г порошка М099 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить 100 мл 0,2%-ного раствора цитрата натрия в среду М411. Тщательно перемешать и разлить в пробирки или флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

Принцип и оценка результата:

Эти среды используют для дифференциации энтеробактерий по способности использовать цитрат в качестве единственного источника углерода. Первоначально цитратная среда была разработана Козером (1), она содержала соль аммония в качестве единственного источника азота и цитрат в качестве единственного источника углерода, что позволяло дифференцировать Escherichia coli и Enterobacter aerogenes. Затем Симмонс (2) модифицировал среду, введя в ее состав агар-агар и бромтимоловый синий (3). Эта среда рекомендована АРНА (4). Среда содержит гидрофосфат аммония в качестве единственного источника азота и цитрат натрия в качестве единственного источника углерода. Бромтимоловый синий – индикатор рН. Микроорганизмы в ходе размножения на среде продуцируют щелочные продукты, которые способствуют изменению цвета индикатора с зеленого на синий.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет травянисто-зеленую окраску, слегка опалесцирует, когда в пробирках формируется скошенный гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М411 (2,13% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2, а раствор М099 (2,43% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет среды	Цитрат (утилизация)
Enterobacter aerogenes (13048)	Хороший или обильный	Синий	+
Salmonella enteritidis (13076)	Хороший или обильный	Синий	+
Salmonella typhimurium (14028)	Хороший или обильный	Синий	+
Salmonella typhi (6539)	Средний или хороший	Зеленый	–
Escherichia coli (25922)	Отсутствует	Зеленый	–
Shigella dysenteriae (13313)	Отсутствует	Зеленый	–