Ксилозо-лизиновый дезоксихолатный агар(КЛД-агар) (М031)

Цей селективний агар рекомендують для виділення і підрахунку Salmonella typhi та інших сальмонел.

 

Зростання на середовищі XLD Agar (M031) (колонії на чорному тлі):
Salmonella серовару Typhimurium (колонії з чорним центром),
Shigella flexneri (безбарвні) і Escherichia coli (жовті колонії)

Склад**:

Інгредієнти	грам /літр
Дріжджовий екстракт	3,00
L-Лізин	5,00
Лактоза	7,50
Сахароза	7,50
Ксилоза	3,50
Натрію хлорид	5,00
Дезоксихолат натрію	2,50
Натрію тіосульфат	6,80
Заліза амонійного цитрат	0,80
Феноловий червоний	0,08
Агар-агар	15,00
Кінцеве значення ph (при 25°С) 7,4 ± 0,2

** Склад вивірений і доведений до відповідності необхідним параметрам

Приготування:

Розмішати 56,68 г порошку в 1000 мл дистильованої води. Обережно підігріти з частим помішуванням до закипання середовища. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СЕРЕДУ. НЕ ДОПУСКАТИ ПЕРЕГРІВАННЯ СЕРЕДОВИЩА. Негайно перенести її у водяну баню на 50°С. Після остигання середовища розлити її в стерильні чашки Петрі. Не рекомендується готувати великі обсяги середовища, так як це потребує тривалого нагрівання.

Принцип і оцінка результату:

Цей селективно-диференціальний агар рекомендований Тейлором (1) для виділення та ідентифікації патогенних кишкових бактерій, зокрема, шигел, з фекалій. Його використовують також у тесті на присутність-відсутність сальмонел (2).

Дезоксихолат пригнічує ріст грампозитивних бактерій. Ксилозу ферментують майже всі ентеробактерії, крім шигел, що дозволяє відрізняти їх від сальмонел.

Сальмонели ферментують ксилозу, але одночасно декарбоксилируют лізин, що, зважаючи повернення рН до лужних значень, може імітувати зростання шигел на даному середовищі. Однак, для попередження такої реакції у лизинположительных коліформних бактерій, у середу в надлишку введені лактоза й сахароза. В результаті їх ферментації утворюється кислота, що перешкоджає декарбоксилюванню лізину непатогенними сероводородпродуцирующими бактеріями. Феноловий червоний – індикатор рН.

Середа ідеально підходить для скринінгу проб зі змішаною мікрофлорою, що містить патогенні кишкові бактерії, так як виділення сальмонел та шигел можливо навіть при рясному рості супутніх мікроорганізмів (3, 4). Цю середу запропоновано використовувати (5) в діагностичних цілях для ідентифікації ентеробактерій.

Контроль якості:

Зовнішній вигляд порошку:

Гомогенний сипучий рожевий порошок.

Щільність готової середовища:

Утворюється середовище, що відповідає за щільністю 1,5%-ному агаровому гелю.

Колір і прозорість готової середовища:

Середовище має червоне забарвлення, прозора або злегка опалесцирует, якщо в чашках Петрі формується гель.

Кислотність середовища:

При 25°С водний розчин (5,67% вага/об) має рН 7,4 ± 0,2.

Культуральні властивості:

Ростові характеристики референс-штамів через 18-24 год при 35-37°С.

Штами мікроорганізмів (АТСС)	Зростання	Колір колоній
Proteusvulgaris(13315)	Хороший або рясний	Жовті
Proteus mirabilis (25933)	Хороший або рясний	Жовті
Salmonella enteritidis (13076)	Хороший або рясний	Червоні з чорним центром
Salmonella paratyphi А	Хороший або рясний	Червоні
Salmonella paratyphi В	Хороший або рясний	Червоні з чорним центром
Salmonellatyphi (6539)	Хороший або рясний	Червоні з чорним центром
Salmonellatyphimurium (14028)	Хороший або рясний	Червоні з чорним центром
Shigellasonnei (25931)	Хороший або рясний	Червоні
Shigella dysenteriae (13313)	Хороший або рясний	Червоні
Enterobacter aerogenes (13048)	Середній	Жовті
Escherichia coli (25922)	Середній	Жовті
Staphylococcus aureus (25923)	Пригнічується	–