Цитратний Агар, Сіммонса М099

Ці середовища використовують для диференціації ентеробактерій.

Склад**:

Інгредієнти	М411 грам/літр	М099 грам/літр
Магнію сульфат	0,20	0,20
Дигідрофосфат амонію	0,20	1,00
Натрію фосфат амонійного	0,80	–
Калію гідрофосфат	–	1,00
Натрію цитрат	–	2,00
Натрію хлорид	5,00	5,00
Бромтимоловый синій	0,08	0,08
Агар-агар	15,00	15,00
Кінцеве значення ph (при 25°С)	7,0 ± 0,2	6,8 ± 0,2

** Склад вивірений і доведений до відповідності необхідним параметрам

Приготування:

Розмішати 21,3 г порошку М411 в 900 мл дистильованої води або 24,28 г порошку М099 в 1000 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Додати 100 мл 0,2%-ного розчину цитрату натрію в середу М411. Ретельно перемішати і розлити у пробірки або флакони. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм (121°С) протягом 15 хв.

Принцип і оцінка результату:

Ці середовища використовують для диференціації ентеробактерій по здатності використовувати цитрат в якості єдиного джерела вуглецю. Спочатку цитратная середовище була розроблена Козером (1), вона містила сіль амонію в якості єдиного джерела азоту і цитрат в якості єдиного джерела вуглецю, що дозволяло диференціювати Escherichia coli і Enterobacter aerogenes. Затем Симмонс (2) модифицировал среду, введя в ее состав агар-агар и бромтимоловый синий (3). Эта среда рекомендована АРНА (4). Среда содержит гидрофосфат аммония в качестве единственного источника азота и цитрат натрия в качестве единственного источника углерода. Бромтимоловый синий – индикатор рН. Микроорганизмы в ходе размножения на среде продуцируют щелочные продукты, которые способствуют изменению цвета индикатора с зеленого на синий.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Утворюється середовище, що відповідає за щільністю 1,5%-ному агаровому гелю.

Колір і прозорість готової середовища:

Середовище має трав'янисто-зеленого забарвлення, злегка опалесцирует, коли в пробірках формується скошений гель.

Кислотність середовища:

При 25°С водний розчин М411 (2,13% вага/об) має рН 7,0 ± 0,2, а розчин М099 (2,43% вага/об) має рН 6,8 ± 0,2.

Культуральні властивості:

Ростові характеристики референс-штамів через 18-24 год при 35-37°С.

Штами мікроорганізмів (АТСС)	Зростання	Колір середовища	Цитрат (утилізація)
Enterobacter aerogenes (13048)	Хороший або рясний	Синій	+
Salmonella enteritidis (13076)	Хороший або рясний	Синій	+
Salmonella typhimurium (14028)	Хороший або рясний	Синій	+
Salmonella typhi (6539)	Середній або хороший	Зелений	–
Escherichia coli (25922)	Відсутній	Зелений	–
Shigella dysenteriae (13313)	Відсутній	Зелений	–